什么是基因组文库
基因组文库是一组 DNA 克隆，代表特定生物体 DNA 的全部内容。DNA克隆通过在微生物中复制繁殖。基因组文库允许研究人员从文库中分离感兴趣的DNA片段进行研究。基因组文库在全基因组测序中很重要。
基因组文库是如何产生的
(相关资料图)
基因组文库制备所涉及的步骤如下所述。
基因组DNA提取和纯化
用特定的限制性内切酶消化基因组DNA – 这可能会导致一组具有相似大小的 DNA 片段。每个片段可能包含基因组的一个或两个基因。
将DNA片段插入特定类型的载体中 – 使用相同的限制性内切酶消化载体，然后将插入片段连接到载体中。载体的选择取决于基因组的大小。载体容量如下所示。
图1.载体容量
4.转化为宿主 – 在大多数情况下，宿主是细菌或酵母。在宿主复制过程中形成特定DNA片段的克隆。
图2.基因组文库制备
库滴度的测定
文库的滴度使研究人员能够了解样品中有多少转化的宿主细胞。它是通过稀释转化的细胞并计算每体积的细胞数量来完成的。
筛选库
筛选允许从文库中分离特定的DNA片段。它主要可以通过两种方式完成，要么通过直接选择重组体，要么检测表达。直接选择可以通过PCR和菌落杂交来完成。
结论
基因组文库是代表特定生物体基因组中整个DNA内容的DNA片段的集合。它是通过将基因组的片段DNA插入载体并将重组分子转化为宿主细胞进行增殖而产生的。
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